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預(yù)固定不動(dòng)難題

染色前固定不動(dòng)體細(xì)胞對(duì)流式的結(jié)果危害極大

大家一般由于下列幾類(lèi)緣故采用先向體細(xì)胞固定不動(dòng)，隨后開(kāi)展流式的試驗(yàn)：便捷（許多 試驗(yàn)一天沒(méi)法做了）、安全性（有生物毒性的樣版務(wù)必固定不動(dòng)殺掉體細(xì)胞后開(kāi)展試驗(yàn)）及其胞內(nèi)染色。殊不知固定不動(dòng)會(huì)更改蛋白的表位，導(dǎo)致結(jié)果不精i確，乃至不正確。大家查看材料發(fā)覺(jué)Biolegend企業(yè)干了很多的試驗(yàn)，較為了不固定不動(dòng)和固定不動(dòng)（4%多聚甲醛）對(duì)流式的染色結(jié)果的危害。

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1.配備0.2M的PB水溶液（含磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉），而不是0.1M的PB水溶液；

2.稱(chēng)量需求量的多聚甲醛（例如20克），殺蟲(chóng)劑多聚甲醛廠(chǎng)家，并倒進(jìn)1L容積的三角燒瓶中，隨后倒進(jìn)需求量的0.2MPB水溶液（例如250毫升），再添加適量的純水；

3.在量杯中放進(jìn)電機(jī)轉(zhuǎn)子，并且用100ml量杯蓋在1L三角燒瓶上避免 多聚甲醛蒸發(fā)，隨后一同放進(jìn)磁力攪拌爐上加溫（此一部分應(yīng)在通風(fēng)柜內(nèi)進(jìn)行）；

4.待多聚甲醛剛開(kāi)始溶化的情況下，消毒劑多聚甲醛廠(chǎng)家，意味著溫度早已貼近70℃，必須時(shí)刻檢測(cè)（超出70℃可根據(jù)添加一定量的純水來(lái)減少溫度）；

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在免i疫染色試驗(yàn)中，假如能用的抗i體應(yīng)用實(shí)際效果均不佳，有三種方法能夠使之改進(jìn)。

先提議使用所述二種固定不動(dòng)方法，由于這二種方法的固定不動(dòng)體制存有非常大差別。抗i體在一種固定不動(dòng)方法中檢驗(yàn)實(shí)際效果不理想化，有可能在另一種固定不動(dòng)方法中工作中優(yōu)良。第二個(gè)解決困難的方法是減少固定不動(dòng)液的濃度值，用系列產(chǎn)品稀釋液的固定不動(dòng)液開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。多聚甲醛廠(chǎng)家

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下邊挑選的方法盡管簡(jiǎn)易，殺菌劑多聚甲醛廠(chǎng)家，但在十分較低濃度的固定不動(dòng)液的狀況下，仍能做到優(yōu)良的固定不動(dòng)實(shí)際效果。第三種方法是依據(jù)固定不動(dòng)方法來(lái)制取抗i體，先將抗原用固定不動(dòng)液固定不動(dòng)后，寧德多聚甲醛廠(chǎng)家，再去免i疫力小動(dòng)物造成抗i體。在這類(lèi)狀況下，常用抗原將和試驗(yàn)中固定不動(dòng)后的抗原十分類(lèi)似，可以得到 融合固定不動(dòng)抗原的抗i體。多聚甲醛廠(chǎng)家